一種牛腸激酶的cDNA片段、高效表達重組質粒及其基因工程菌和表達方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510039882.7 申請日 -
公開（公告）號 CN104561063A 公開（公告）日 2015-04-29
申請公布號 CN104561063A 申請公布日 2015-04-29
分類號 C12N15/57(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12N9/64(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周曉雷;董力;張世光;朱重悅;鄒衛(wèi);黃巖;段普凡 申請（專利權）人 河北百奧生物制品有限公司
代理機構 石家莊新世紀專利商標事務所有限公司 代理人 河北科技大學;河北百奧生物制品有限公司
地址 050000 河北省石家莊市裕華路70號河北科技大學（中校區(qū)）
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種牛腸激酶的cDNA片段，其核苷酸序列為SEQ?ID?No.4；本發(fā)明還涉及該cDNA片段構建的重組質粒和基因工程菌，另外還涉及上述基因工程菌的表達方法。本發(fā)明對ekl基因的密碼子進行優(yōu)化，優(yōu)化后的ekl基因片段可以實現(xiàn)甲醇酵母對EKL基因的高效表達。本發(fā)明在ekl基因序列的C末端插入了組氨酸標簽，以利于對目標蛋白的純化。本發(fā)明對甲醇酵母的表達條件進行了優(yōu)化，可以使重組的基因工程菌表達牛腸激酶的量再增加1倍，進一步提高發(fā)酵效率，提高牛腸激酶的生產能力。