AS-PCR引物設(shè)計(jì)方法、基因多態(tài)性檢測(cè)方法及試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201511015817.7 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN105506101B 公開(公告)日 2019-02-19
申請(qǐng)公布號(hào) CN105506101B 申請(qǐng)公布日 2019-02-19
分類號(hào) C12Q1/6883(2018.01)I; C12N15/11(2006.01)I; C12N15/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉小芳; 李丙亮 申請(qǐng)(專利權(quán))人 上??埔嗌锟萍加邢薰?/a>
代理機(jī)構(gòu) 北京信慧永光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 代理人 上??埔嗌锟萍加邢薰?/td>
地址 201201 上海市張江高科技產(chǎn)業(yè)東區(qū)瑞慶路528號(hào)14幢乙號(hào)1層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種AS?PCR引物設(shè)計(jì)方法、基因多態(tài)性檢測(cè)方法及試劑盒,所述方法及試劑盒用于對(duì)可能包含等位基因變異區(qū)域的靶序列進(jìn)行檢測(cè)以確定等位基因變體是否存在。所述AS?PCR引物設(shè)計(jì)方法包括以下步驟:(i)針對(duì)包含待測(cè)等位基因變異區(qū)域的靶序列設(shè)計(jì)AS?PCR引物;(ii)對(duì)步驟(i)所設(shè)計(jì)的AS?PCR引物進(jìn)行修飾,在引物5’端1~8個(gè)堿基內(nèi)標(biāo)記一熒光基團(tuán),對(duì)等位基因變異區(qū)域的堿基用淬滅基團(tuán)標(biāo)記;(iii)在步驟(ii)所設(shè)計(jì)的AS?PCR引物3’端額外合成1~3個(gè)與待測(cè)基因不互補(bǔ)的堿基。相較于傳統(tǒng)AS?PCR單一的檢測(cè)位點(diǎn)能力,本發(fā)明的基因多態(tài)性引物設(shè)計(jì)方法和檢測(cè)方法及試劑盒可以兼并識(shí)別突變位點(diǎn),并且可以將探針和引物合二為一,節(jié)約了引物合成成本、設(shè)計(jì)時(shí)間,設(shè)計(jì)也方便易懂,容易掌握。