一種晶狀體上皮干細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法
基本信息
申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201510032551.0 | 申請(qǐng)日 | - |
公開(公告)號(hào) | CN104789521A | 公開(公告)日 | 2015-07-22 |
申請(qǐng)公布號(hào) | CN104789521A | 申請(qǐng)公布日 | 2015-07-22 |
分類號(hào) | C12N5/074(2010.01)I | 分類 | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 侯睿;蔡惠民 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 廣州康睿生物醫(yī)藥科技股份有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 成都高遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) | 代理人 | 廣州康睿生物醫(yī)藥科技有限公司;廣州康睿生物醫(yī)藥科技股份有限公司 |
地址 | 510663 廣東省廣州市廣州高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)科學(xué)城攬?jiān)侣?0號(hào)科技創(chuàng)新基地A區(qū)第二層 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了一種晶狀體上皮干細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法,它包括以下步驟:(1)取晶狀體前囊膜,剪成碎片,消化,將獲得的細(xì)胞鋪于包被有基質(zhì)的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中;(2)加入添加有含有15~25%FBS、50~150μg/L人表皮生長(zhǎng)因子(FGF)、5-10mg/L胰島素、5-10mg/L氫化可的松、5-10mg/L霍亂弧菌毒素、0.01-0.05mg/L3,3′,5-碘-L-對(duì)羥基苯丙氨酸、1-5mg/L腺嘌呤、5~10mg/L甘氨酸、6~12mg/L丙氨酸、10~16mg/L天冬酰胺、10~16mg/L天冬氨酸、12~18mg/L谷氨酸、8~15mg/L脯氨酸、7~14mg/L絲氨酸的MEM培養(yǎng)液,放入37℃孵箱中培養(yǎng),2-3天形成克隆,10-14天可形成單層活性的晶體干細(xì)胞細(xì)胞。本發(fā)明還公開了一種晶狀體上皮干細(xì)胞的分離培養(yǎng)液。本發(fā)明方法可以分離得到原代晶狀體上皮干細(xì)胞,干細(xì)胞的活性高,本發(fā)明方法簡(jiǎn)便、易操作,應(yīng)用前景良好。 |
