一種體外培養(yǎng)臍帶血CIK細(xì)胞的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010984155.9 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN112029723B 公開（公告）日 2021-08-06
申請(qǐng)公布號(hào) CN112029723B 申請(qǐng)公布日 2021-08-06
分類號(hào) C12N5/0783（2010.01）I;C12N5/078（2010.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 杜煒明;張隴娟;梁杰;馬超群 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 鄭州佐爵生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京同輝知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 饒富春
地址 712000陜西省咸陽市秦都區(qū)高新區(qū)高科三路中韓產(chǎn)業(yè)園A區(qū)205廠房
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種體外培養(yǎng)臍帶血CIK細(xì)胞的方法，包括以下步驟：（1）從臍帶血中分離得到臍帶血單個(gè)核細(xì)胞，用無血清培養(yǎng)基制備為單核細(xì)胞懸液；（2）向上述步驟（1）的細(xì)胞懸液中添加IFN?γ850?950U/mL，培養(yǎng)1天后添加IL?2 600?700U/mL、單抗CD3 20?30ng/mL、三肽?1銅20?50ng/mL，繼續(xù)培養(yǎng)；（3）培養(yǎng)至第3?4天添加甜葉菊苷110?120ng/mL，積雪草苷80?100ng/mL，誘導(dǎo)培養(yǎng)至第12天收集細(xì)胞，在誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中每隔1?2天添加無血清培養(yǎng)基使細(xì)胞濃度保持在1?2×10個(gè)/mL，無血清培養(yǎng)基中含有甜葉菊苷35?40ng/mL，積雪草苷20?30ng/mL。本發(fā)明采用無血清培養(yǎng)基，在培養(yǎng)過程中添加三肽?1銅，甜葉菊苷和積雪草苷，誘使擴(kuò)增得到的CIK細(xì)胞數(shù)量多，并且保持較好的細(xì)胞活性，提高其在臨床應(yīng)用中的價(jià)值。