一種凍存細(xì)胞復(fù)蘇的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810128819.4 申請日 -
公開（公告）號 CN108330098A 公開（公告）日 2018-07-27
申請公布號 CN108330098A 申請公布日 2018-07-27
分類號 C12N5/07 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李杰;劉振云;徐華棟;王維;程豐偉 申請（專利權(quán)）人 安徽古一生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 合肥市浩智運(yùn)專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 安徽古一生物科技有限公司
地址 238000 安徽省合肥市巢湖市經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)管委會(huì)南三樓301室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種凍存細(xì)胞復(fù)蘇的方法，包括以下步驟：(1)清洗液的準(zhǔn)備：準(zhǔn)備第一離心管，加入DMEM無血清培養(yǎng)基和胎牛血清(FBS)，混勻后，放入水浴鍋中預(yù)熱；(2)凍存細(xì)胞的融化：從液氮中迅速取出細(xì)胞凍存管，迅速轉(zhuǎn)移至水浴鍋中使完全融化；(3)轉(zhuǎn)移：將細(xì)胞冷凍液從凍存管中吸出，轉(zhuǎn)移至第二離心管中，然后吸取適量清洗液逐滴加入到細(xì)胞冷凍液中，前期每次一滴，輕搖管身，使清洗液緩慢融入冷凍液中，加入1?2ml清洗液后，可逐漸加快加液速度；(4)離心：將加入清洗液后的細(xì)胞冷凍液進(jìn)行離心；(5)孵育：轉(zhuǎn)移至T?175培養(yǎng)瓶，溫度為35?40℃，CO2為3?7％環(huán)境下孵育。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：顯著提高細(xì)胞的活率。