雙sgRNA表達(dá)質(zhì)粒及其文庫的構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710262042.6 申請日 -
公開（公告）號(hào) CN107090466B 公開（公告）日 2020-02-28
申請公布號(hào) CN107090466B 申請公布日 2020-02-28
分類號(hào) C12N15/66;C12N15/113;C12N15/63;C40B40/06;C40B50/06 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 謝震;馬大程 申請（專利權(quán)）人 北京合生基因科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京合生基因科技有限公司;清華大學(xué)
地址 100084 北京市海淀區(qū)北京市100084信箱82分箱清華大學(xué)專利辦公室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種雙sgRNA表達(dá)質(zhì)粒及其文庫的構(gòu)建方法。本發(fā)明所提供的方法一是利用兩輪golden gate拼裝技術(shù)，將預(yù)先設(shè)計(jì)在寡核苷酸上的編碼雙sgRNA中的間隔RNA的DNA片段插入到載體中；方法二是利用三輪golden gate拼裝技術(shù)構(gòu)建隨機(jī)雙敲除sgRNA表達(dá)質(zhì)粒文庫。本發(fā)明所提供的構(gòu)建雙sgRNA表達(dá)質(zhì)粒文庫的方法與現(xiàn)有方法相比，操作更加簡便且大大縮短了構(gòu)建時(shí)間。本發(fā)明對于鑒定非編碼區(qū)基因的生物學(xué)功能以及鑒定基因與基因的相互作用具有重要意義。