一種簡(jiǎn)易快速克隆植物基因的原位PCR技術(shù)

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202011610133.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN114686475A 公開(kāi)（公告）日 2022-07-01
申請(qǐng)公布號(hào) CN114686475A 申請(qǐng)公布日 2022-07-01
分類(lèi)號(hào) C12N15/10（2006.01）I 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 吳疆;周靈美;謝曉東 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 天津農(nóng)學(xué)院
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 300392天津市西青區(qū)津靜路22號(hào)天津農(nóng)學(xué)院農(nóng)學(xué)與資源環(huán)境學(xué)院
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明的目的是提供一種基于原位PCR技術(shù)簡(jiǎn)便、快捷克隆植物基因的方法。本發(fā)明基于原位PCR技術(shù)，采用堿溶液與表面活性劑混合作為裂解液，比較了兩種堿溶液和三種表面活性劑的裂解效果，從中選出了一種最佳的裂解液條件。相比傳統(tǒng)PCR技術(shù)通過(guò)CTAB法和SDS法的繁瑣步驟去除細(xì)胞內(nèi)蛋白、多糖、RNA、鹽類(lèi)等雜質(zhì)，提純DNA或RNA進(jìn)行擴(kuò)增，程序復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)，每次提取DNA時(shí)都需要大量實(shí)驗(yàn)材料與接觸有害試劑，無(wú)法減少耗材與人力資源，且在提取過(guò)程中會(huì)造成DNA的損傷。本研究所用的方法無(wú)需提DNA或RNA，使用少量煙草葉片與常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)試劑，即可短時(shí)高效裂解煙草葉片內(nèi)表面細(xì)胞壁，使DNA分子裸露，為分子生物學(xué)提供了簡(jiǎn)便、快捷的提取方法，更為經(jīng)濟(jì)、高效。