一種基于Vcre-Vloxp重組酶體系的基因編輯方法及其應(yīng)用
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010840799.0 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN111705079B | 公開（公告）日 | 2020-09-25 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN111705079B | 申請(qǐng)公布日 | 2020-09-25 |
| 分類號(hào) | C12N15/85(2006.01)I;C12N15/89(2006.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 趙金龍;朱石磊;李雯婧;林梓凡 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 上海藥康生物科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京品源專利代理有限公司 | 代理人 | 鞏克棟 |
| 地址 | 201204 上海市浦東新區(qū)中國(guó)（上海）自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)張衡路200號(hào)2幢3層 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明提供一種基于Vcre?Vloxp重組酶體系的基因編輯方法及其應(yīng)用，所述方法包括如下步驟：（1）將Vloxp序列連接于雙鏈DNA的5′末端或3′末端，或者將所述Vloxp序列插入雙鏈DNA的功能區(qū)之間；（2）再將所述雙鏈DNA、Vcre蛋白和基因編輯的反應(yīng)液混合，轉(zhuǎn)入目的細(xì)胞中完成基因編輯。當(dāng)雙鏈DNA在整合過(guò)程中出現(xiàn)重復(fù)連接的現(xiàn)象時(shí)，會(huì)在Vcre蛋白的作用下被剪切，最終只剩下一個(gè)雙鏈DNA，且無(wú)論多少個(gè)雙鏈DNA發(fā)生串聯(lián)，Vcre蛋白都能夠切除從第一個(gè)Vloxp序列到最后一個(gè)Vloxp序列之間所有的重復(fù)片段，因此，所述方法能夠明顯降低重組DNA片段在整合過(guò)程中出現(xiàn)的串聯(lián)重復(fù)現(xiàn)象。?? |
