一種結(jié)合激光技術(shù)的生物樣本玻璃化冷凍解凍方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910096921.5 申請日 -
公開（公告）號 CN109797147A 公開（公告）日 2019-05-24
申請公布號 CN109797147A 申請公布日 2019-05-24
分類號 C12N13/00（2006.01）I; C12N5/075（2010.01）I; C12N5/073（2010.01）I; A01N1/02（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 金波; 劉湘娟 申請（專利權(quán)）人 力盟低溫醫(yī)學(xué)（深圳）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳市漢唐知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 劉志海
地址 518000 廣東省深圳市坪山區(qū)坪山街道聚龍山片區(qū)金威源工業(yè)園C802
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種結(jié)合激光技術(shù)的生物樣本玻璃化冷凍解凍方法。它包括S1、從細(xì)胞緩沖液中取出生物樣本后浸置于含有納米碳粒的冷凍液中并保持靜浸狀態(tài)至少1.5min，然后將包含有細(xì)胞樣本的冷凍液的液滴轉(zhuǎn)移至玻璃化冷凍載桿上，最后直接將玻璃化冷凍載桿浸入液氮中；S2、將玻璃化冷凍載桿從液氮中取出后，利用激光脈沖向液滴施加熱量；S3、將解凍后的細(xì)胞樣本順序地在蔗糖濃度含量由大到小的多個解凍液中進(jìn)行洗滌；S4、將復(fù)蘇后的細(xì)胞樣本轉(zhuǎn)移至二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。本發(fā)明采用低濃度的冷凍液對生物樣本進(jìn)行玻璃化冷凍保存處理、利用激光實(shí)現(xiàn)對生物樣本的快速解凍處理并結(jié)合后續(xù)的復(fù)蘇處理步驟，可極大地提高生物樣本在低濃度的玻璃化保存液中的成活率以及發(fā)育潛能。