外源表達破傷風(fēng)毒素受體結(jié)合區(qū)Hc的高密度發(fā)酵方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201611256457.4 申請日 -
公開（公告）號 CN106520870B 公開（公告）日 2019-12-13
申請公布號 CN106520870B 申請公布日 2019-12-13
分類號 C12P21/02;C07K1/20;C07K1/18;C12R1/19 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 魏琪;于蕊;張騫;徐俊杰;陳薇 申請（專利權(quán)）人 四川自豪時代藥業(yè)有限公司
代理機構(gòu) 成都高遠知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 四川自豪時代藥業(yè)有限公司;中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所
地址 620010 四川省眉山市經(jīng)濟開發(fā)區(qū)新區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種外源高表達破傷風(fēng)毒素受體結(jié)合區(qū)Hc的發(fā)酵方法，步驟如下：(1)取含有破傷風(fēng)毒素受體結(jié)合區(qū)Hc核苷酸序列的工程菌，培養(yǎng)至OD600值為3.0?5.0，得種子液；(2)取種子液，加入發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，至溶氧值及pH值快速上升，且pH的上升幅度大于0.2/min、溶氧值大于10％/min時，補料；(3)當(dāng)OD600值為17時進行誘導(dǎo)表達，加入終濃度為0.2mM的IPTG，降溫至28℃，繼續(xù)補料，培養(yǎng)至OD600值為40?50。本發(fā)明方可以高表達獲得可溶性的破傷風(fēng)毒素受體結(jié)合區(qū)Hc，且發(fā)酵工藝簡便，成本低廉，可應(yīng)用于大規(guī)模生產(chǎn)制備破傷風(fēng)Hc亞單位疫苗，應(yīng)用前景良好。