一種外源高表達(dá)乳酸脫氫酶突變體的高密度發(fā)酵方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811071121.X 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN109280652A 公開（公告）日 2019-01-29
申請(qǐng)公布號(hào) CN109280652A 申請(qǐng)公布日 2019-01-29
分類號(hào) C12N9/04;C12R1/19 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 魏琪;張騫;邱鵬;蔣飛;王洪;羅紅 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 四川自豪時(shí)代藥業(yè)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 成都高遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 四川自豪時(shí)代藥業(yè)有限公司
地址 620010 四川省眉山市東坡區(qū)經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)新區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種外源高表達(dá)乳酸脫氫酶突變體的高密度發(fā)酵方法，步驟如下：(1)取含有乳酸脫氫酶突變體核苷酸序列的工程菌，培養(yǎng)至OD600值為2.5～4.0，得種子液；(2)取種子液，加入發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，至溶氧值及pH值快速上升，且pH的上升幅度大于0.2/min、溶氧值大于10％/min時(shí)，補(bǔ)料；(3)當(dāng)OD600值為20～30時(shí)進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)，加入終濃度為0.5mmol/L的IPTG，降溫至30℃，繼續(xù)補(bǔ)料，培養(yǎng)至OD600值為70～90。本發(fā)明可大幅提高含可溶性乳酸脫氫酶突變體宿主菌的收獲水平，且發(fā)酵工藝簡(jiǎn)便，成本低廉，可應(yīng)用于大規(guī)模生產(chǎn)制備乳酸脫氫酶突變體，有很好的應(yīng)用前景。