一種高保真靶標(biāo)基因建庫(kù)方法及其試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110230543.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN112941147A 公開(kāi)(公告)日 2021-06-11
申請(qǐng)公布號(hào) CN112941147A 申請(qǐng)公布日 2021-06-11
分類(lèi)號(hào) C12Q1/6806;C40B50/06;C40B40/06 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 崔品 申請(qǐng)(專利權(quán))人 深圳市睿法生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳鼎合誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 周建軍;郭燕
地址 518000 廣東省深圳市坪山區(qū)坑梓街道秀新社區(qū)聚龍山A路深城投創(chuàng)意工廠生命科學(xué)園廠房B2102
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種高保真靶標(biāo)基因建庫(kù)方法及其試劑盒,該方法包括磷酸化步驟,在模板分子的5’端修飾磷酸基團(tuán);退火延伸步驟,使用第一引物退火、延伸,得到靶核苷酸分子;第一測(cè)序接頭連接步驟,將第一測(cè)序接頭連接至靶核苷酸分子,獲得第一測(cè)序接頭連接產(chǎn)物;酶切步驟,切斷第一引物,得到第一測(cè)序接頭連接產(chǎn)物;雙鏈末端修平步驟,切除單鏈序列,得到平末端第一測(cè)序接頭連接產(chǎn)物;第二測(cè)序接頭連接步驟,將第二測(cè)序接頭連接至平末端第一測(cè)序接頭連接產(chǎn)物,得到第二測(cè)序接頭連接產(chǎn)物;擴(kuò)增步驟,用第二引物、第三引物擴(kuò)增第二測(cè)序接頭連接產(chǎn)物,得到文庫(kù)。本發(fā)明將常規(guī)的建庫(kù)和捕獲分開(kāi)的步驟整合為一個(gè)流程,有效簡(jiǎn)化流程,減少操作過(guò)程中DNA的損失。