一種檢測絕對端粒長度的PCR方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910312065.2 申請日 -
公開（公告）號 CN109943626A 公開（公告）日 2019-06-28
申請公布號 CN109943626A 申請公布日 2019-06-28
分類號 C12Q1/6851 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 白玉杰;林思妮;孫海星;張艷;張曉娟;王建輝;董紅宇;吳東穎 申請（專利權）人 山東荊衛(wèi)生物科技有限公司
代理機構 - 代理人 -
地址 261000 山東省濰坊市峽山區(qū)怡峽街197號生命科學園D棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種檢測絕對端粒長度（absolute telomere length）的PCR方法，能方便準確地檢測人端粒的絕對長度，屬于分子生物技術和醫(yī)學檢測領域。本發(fā)明采用基因合成的方法，分別合成端粒和單拷貝基因36B4的寡核苷酸序列，并連接到質粒載體上構建標準品，使用大腸桿菌體外擴增質粒標準品，提取質粒DNA，測量濃度，計算拷貝數(shù)及端粒總長度。確定標準品起始量，進行梯度稀釋，采用熒光定量PCR法（Q?PCR法）分別得到端粒及36B4的標準曲線，通過標準曲線對待測樣本DNA的端粒總長度以及36B4的拷貝數(shù)絕對定量，從而計算待測樣本DNA的平均絕對端粒長度。采用絕對端粒長度PCR法檢測端粒長度，具有成本低、周期短、準確度高的優(yōu)點，適合高通量檢測，易于臨床推廣使用，實用性較強。