一種檢測絕對端粒長度的PCR方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910312065.2 申請日 -
公開(公告)號 CN109943626A 公開(公告)日 2019-06-28
申請公布號 CN109943626A 申請公布日 2019-06-28
分類號 C12Q1/6851 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 白玉杰;林思妮;孫海星;張艷;張曉娟;王建輝;董紅宇;吳東穎 申請(專利權)人 山東荊衛(wèi)生物科技有限公司
代理機構 - 代理人 -
地址 261000 山東省濰坊市峽山區(qū)怡峽街197號生命科學園D棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種檢測絕對端粒長度(absolute telomere length)的PCR方法,能方便準確地檢測人端粒的絕對長度,屬于分子生物技術和醫(yī)學檢測領域。本發(fā)明采用基因合成的方法,分別合成端粒和單拷貝基因36B4的寡核苷酸序列,并連接到質粒載體上構建標準品,使用大腸桿菌體外擴增質粒標準品,提取質粒DNA,測量濃度,計算拷貝數(shù)及端粒總長度。確定標準品起始量,進行梯度稀釋,采用熒光定量PCR法(Q?PCR法)分別得到端粒及36B4的標準曲線,通過標準曲線對待測樣本DNA的端粒總長度以及36B4的拷貝數(shù)絕對定量,從而計算待測樣本DNA的平均絕對端粒長度。采用絕對端粒長度PCR法檢測端粒長度,具有成本低、周期短、準確度高的優(yōu)點,適合高通量檢測,易于臨床推廣使用,實用性較強。