一種高效表達豬瘟E2-IL1融合蛋白的重組CHO細胞株及其構建方法和應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010215284.1 申請日 -
公開（公告）號 CN111304173A 公開（公告）日 2020-06-19
申請公布號 CN111304173A 申請公布日 2020-06-19
分類號 C12N5/10(2006.01)I 分類 -
發(fā)明人 周佳彬;劉喜鳳;劉燕;楊闖;曹玉飛;鄭杰;馬寧寧 申請（專利權）人 北京鼎持生物技術有限公司
代理機構 北京金宏來專利代理事務所（特殊普通合伙） 代理人 浙江鼎持生物制品有限公司;北京鼎持生物技術有限公司
地址 311800浙江省紹興市諸暨市陶朱街道環(huán)城北路368號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種高效表達豬瘟E2?IL1融合蛋白的重組CHO細胞株及其構建方法和應用。該重組CHO細胞株經(jīng)載有人工合成的E2?IL1基因序列的載體轉染，通過單克隆細胞篩選，獲得表達E2?IL1融合蛋白的重組細胞株；擴大培養(yǎng)至6孔板階段即可實現(xiàn)無血清懸浮培養(yǎng)，縮短了培養(yǎng)時間，提高了表達量；用該E2?IL1融合蛋白與佐劑ISA 206 VG制成疫苗免疫仔豬能夠同時誘導體液免疫和細胞免疫，血清學檢測結果不僅能夠產(chǎn)生并檢測到針對E2的中和抗體，同時能夠在血清中檢測到較高的干擾素?γ以及能夠檢測到較強的淋巴細胞增殖反應。本發(fā)明構建的重組CHO細胞株不僅能夠高表達E2?IL1融合蛋白，而且可以實現(xiàn)抗原蛋白的無血清、大規(guī)模、穩(wěn)定生產(chǎn)，該細胞株可以應用于豬瘟E2亞單位疫苗的研發(fā)。??