一種人皮膚成纖維細(xì)胞提取方法及其培養(yǎng)基
基本信息
| 申請?zhí)?/td> | CN201811304237.3 | 申請日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN109294981A | 公開（公告）日 | 2019-02-01 |
| 申請公布號(hào) | CN109294981A | 申請公布日 | 2019-02-01 |
| 分類號(hào) | C12N5/077 | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 高戎戎;佟艷輝 | 申請（專利權(quán)）人 | 上海中溢精準(zhǔn)醫(yī)療科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 上海容慧專利代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | 于曉菁 |
| 地址 | 200021 上海市黃浦區(qū)淮海中路622弄102室 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種人皮膚成纖維細(xì)胞提取方法，其包括步驟：1）將人的真皮組織剪碎并用含0.25％IV型膠原酶和0.1％胰蛋白酶的混合酶溶液消化至大組織塊消失后終止消化；2）過濾消化后的真皮組織，收集濾液，離心，棄上清，收集沉淀的細(xì)胞并接種于培養(yǎng)瓶中，用篩選培養(yǎng)基培養(yǎng)；3）培養(yǎng)至細(xì)胞融合度達(dá)到70％后更換部分篩選培養(yǎng)基為擴(kuò)增培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)；4）培養(yǎng)至細(xì)胞融合度達(dá)到90％后，傳代培養(yǎng)，并更換全部培養(yǎng)基為擴(kuò)增培養(yǎng)基。其中，篩選培養(yǎng)基的配方為：DMEM高糖培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，其中含有體積含量為8?12％的澳洲胎牛血清，以及0.4?0.6ng/mL的EGF和4?6ng/mL的bFGF作為添加因子；擴(kuò)增培養(yǎng)基的配方為：DMEM高糖培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，其中含有體積含量為8?12％的澳洲胎牛血清。 |
