一種重組變構(gòu)膠原酶的制備方法及其應(yīng)用
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201810851432.1 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN108949730A | 公開(kāi)（公告）日 | 2018-12-07 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN108949730A | 申請(qǐng)公布日 | 2018-12-07 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N9/52;A61K38/48;A61P3/04;A61P17/02;A61P35/00;A61K8/66;A61Q19/00;A23L33/195 | 分類(lèi) | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 倉(cāng)勇;張震;杜剛;陳福鼎 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 | 杭州觀蘇生物技術(shù)有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京天奇智新知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 李振文 |
| 地址 | 200131 上海市浦東新區(qū)中國(guó)（上海）自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)環(huán)科路999弄17號(hào)205室 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明涉及重組變構(gòu)膠原酶的純化方法及其應(yīng)用，公開(kāi)了一種制備高純度單一突變體膠原蛋白酶ColH的方法和所獲得的產(chǎn)品。所述制備高純度單一突變體膠原蛋白酶ColH的方法包括采用特定宿主菌BL21(DE3)表達(dá)E451D單點(diǎn)突變ColH變構(gòu)膠原酶蛋白，經(jīng)低溫菌種發(fā)酵誘導(dǎo)后，提高目的蛋白產(chǎn)量。通過(guò)五步純化：Capto Phenyl HS疏水層析；Capto Q陰離子交換層析；CaptoOctyl疏水層析；Phenyl HP疏水層析；Source 15Q陰離子交換層析后，獲得了純度98％以上的目的蛋白。生物學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，此工藝生產(chǎn)的突變膠原蛋白酶純度高，穩(wěn)定性好，與之前的膠原蛋白酶商品相比具有明顯的優(yōu)勢(shì)，酶比活顯著提高。 |
