基因工程菌的凍干保藏方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111282307.1 申請日 -
公開(公告)號 CN113817609A 公開(公告)日 2021-12-21
申請公布號 CN113817609A 申請公布日 2021-12-21
分類號 C12N1/04(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱天擇;楊逸仙;焦湛東;張鈃 申請(專利權)人 蘇州科正環(huán)保科技有限公司
代理機構(gòu) 蘇州常清專利代理事務所(普通合伙) 代理人 周浩平
地址 215500江蘇省蘇州市常熟高新技術產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)東南大道33號201-A5-2
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基因工程菌的凍干保藏方法,包括以下步驟:將水熊蟲TDP蛋白的基因序列構(gòu)建到pET?28a表達載體上,獲得已導入編碼水熊蟲TDP蛋白的序列的重組質(zhì)粒;將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌感受態(tài)細胞中,獲得已轉(zhuǎn)化的菌液,將菌液涂布在LB培養(yǎng)基上;挑取前一日培養(yǎng)的單克隆菌落,將單克隆菌落接種至液體培養(yǎng)基中進行擴大培養(yǎng),檢測液體培養(yǎng)基中的菌液的吸光值,獲取600nm波長處的吸光值在0.4?0.6之間的待操作菌液;根據(jù)待操作菌液的吸光值,取每毫升10^9個細胞的待操作菌液進行離心,離心完成后清除上清液,取葡萄糖溶液對菌體沉淀進行吹息,獲得混合液;將混合液轉(zhuǎn)移至試管內(nèi),將試管放入凍干機,依次進行冷凍、真空抽干,從而完成凍干保藏。