一種普魯蘭酶產(chǎn)酶菌株及提高其產(chǎn)酶能力的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201510062696.5 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN104726388A 公開(kāi)(公告)日 2015-06-24
申請(qǐng)公布號(hào) CN104726388A 申請(qǐng)公布日 2015-06-24
分類(lèi)號(hào) C12N1/21(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I;C12N9/44(2006.01)I;C12R1/22(2006.01)N 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 焦國(guó)寶;邱立友;孫利鵬;王明道;許苗苗;劉仲敏 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 河南新仰韶生物酶制劑有限公司
代理機(jī)構(gòu) 鄭州聯(lián)科專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 代理人 時(shí)立新
地址 472400 河南省三門(mén)峽市澠池縣黃花工業(yè)區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種高產(chǎn)普魯蘭酶工程菌構(gòu)建方法及所構(gòu)建高產(chǎn)普魯蘭酶工程菌株。該方法包括提取DNA、PCR擴(kuò)增、PCR融合、電擊轉(zhuǎn)化、篩選鑒定等步驟。所構(gòu)建高產(chǎn)普魯蘭酶工程菌株保藏編號(hào)為CGMCC?NO.10357的變棲克雷伯氏菌HN7(Klebsiella?variicola??HN7)為原始出發(fā)菌株。本發(fā)明通過(guò)基因工程技術(shù)將枯草芽孢桿菌P43啟動(dòng)子轉(zhuǎn)化進(jìn)入產(chǎn)普魯蘭酶原始菌株,操作方式易于實(shí)現(xiàn)。由于普魯蘭酶得以在本體內(nèi)得到表達(dá),合成和分泌途徑?jīng)]有發(fā)生改變,不會(huì)發(fā)生質(zhì)粒丟失現(xiàn)象,因而遺傳穩(wěn)定性高;本發(fā)明所構(gòu)建高產(chǎn)普魯蘭酶工程菌株相較原始出發(fā)菌株,普魯蘭酶的酶活和酶表達(dá)量具有較好的提高,因而具有較好的推廣應(yīng)用價(jià)值。