單細(xì)胞測(cè)序的建庫(kù)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910868822.4 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN110438572A 公開(kāi)(公告)日 2019-11-12
申請(qǐng)公布號(hào) CN110438572A 申請(qǐng)公布日 2019-11-12
分類(lèi)號(hào) C40B50/06(2006.01)I; C12Q1/6869(2018.01)I 分類(lèi) 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 孔培濤; 李奇; 陳亞慶; 楊圳; 蔡建飛 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 上海其明信息技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京金信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 上海其明信息技術(shù)有限公司
地址 201210 上海市浦東新區(qū)張江高科技園區(qū)張江路665號(hào)907室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種單細(xì)胞測(cè)序的建庫(kù)方法,其包括(a)對(duì)甲醛固定的細(xì)胞利用第一反轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)反轉(zhuǎn)錄標(biāo)記第一輪條形碼(barcode);(b)利用連接反應(yīng),使用第二輪引物和第三輪引物標(biāo)記第二輪和第三輪barcode;(c)裂解生成子文庫(kù),模板轉(zhuǎn)換后,利用PCR富集模板;(d)利用index PCR標(biāo)記第四輪barcode。本發(fā)明的建庫(kù)方法采用固定的細(xì)胞或者細(xì)胞核作為實(shí)驗(yàn)材料,而不僅限于新鮮的樣品,允許樣品來(lái)源的復(fù)雜性,可以更為有效地利用樣品。