一種利用探針熔解技術(shù)準(zhǔn)確檢測KRAS基因突變的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310027935.4 申請日 -
公開（公告）號 CN103088137B 公開（公告）日 2014-11-05
申請公布號 CN103088137B 申請公布日 2014-11-05
分類號 C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳超;戴鵬高;劉金輝;宿志瑞;鄒暉 申請（專利權(quán)）人 陜西佰美醫(yī)學(xué)檢驗有限公司
代理機構(gòu) 西安智邦專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 陜西北美基因股份有限公司;陜西佰美醫(yī)學(xué)檢驗有限公司
地址 710069 陜西省西安市太白北路229號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提出一種利用探針熔解技術(shù)準(zhǔn)確檢測KRAS基因突變的方法，不僅節(jié)省了耗材，同時具有高靈敏度，高特異性的特點，檢測結(jié)果更可靠。該方法包括以下步驟：（1）分子信標(biāo)探針和模板擴增引物的設(shè)計及合成，其中設(shè)計的上游引物(22nt)為5’-CAGACTGTGTTTCTCCCTTCTC-3’，延伸阻滯引物(36nt)為5’-taAGGTCAAGAGGACTCATGTACTGGTCCCTCATTG-3’，分子信標(biāo)探針(34nt)為FAM-acgcATTGTACTCCTCTTGACCTGCTGTatgcgt-BHQ2；（2）提取被測樣本的基因組DNA；（3）配制反應(yīng)體系；（4）PCR反應(yīng)。