一種基于探針熔解技術(shù)準(zhǔn)確檢測(cè)BRAF基因突變的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201310026087.5 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN103103269A 公開(kāi)（公告）日 2013-05-15
申請(qǐng)公布號(hào) CN103103269A 申請(qǐng)公布日 2013-05-15
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 戴鵬高;陳超;劉金輝;焦維麗;鄒暉 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 陜西佰美醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 西安智邦專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 陜西北美基因股份有限公司;陜西佰美醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司
地址 710069 陜西省西安市太白北路229號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提出一種基于探針熔解技術(shù)準(zhǔn)確檢測(cè)BRAF基因突變的方法，不僅節(jié)省了耗材，同時(shí)具有高靈敏度，高特異性的特點(diǎn)，檢測(cè)結(jié)果更可靠。該方法包括以下步驟：（1）分子信標(biāo)探針和模板擴(kuò)增引物的設(shè)計(jì)及合成；其中設(shè)計(jì)的上游引物(27nt)為5’-TGTTTTCCTTTACTTACTACACCTCAG-3’，延伸阻滯引物(43nt)為5’-acGCTACAGTGAAATCTCGGACAACTGTTCAAACTGATGGGAC-3’，分子信標(biāo)探針(35nt)為FAM-ccgcaTCGAGATTTCACTGTAGCTAGACCAtgcgg-BHQ2；（2）提取被測(cè)樣本的基因組DNA；（3）配制反應(yīng)體系；（4）PCR反應(yīng)。