一種快速檢測(cè)KRAS基因突變的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201210233750.4 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN102796817B 公開(kāi)（公告）日 2014-06-25
申請(qǐng)公布號(hào) CN102796817B 申請(qǐng)公布日 2014-06-25
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳超;劉金輝;戴鵬高;王浩;王剛 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 陜西佰美醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 西安智邦專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 陜西北美基因股份有限公司;陜西佰美醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司
地址 710069 陜西省西安市太白北路229號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提出一種快速檢測(cè)KRAS基因突變的方法，以克服傳統(tǒng)探針熔解曲線法靈敏度低，檢測(cè)不精確的缺點(diǎn)。該快速檢測(cè)KRAS基因突變的方法，包括以下步驟：（1）分子信標(biāo)探針和模板擴(kuò)增引物的設(shè)計(jì)及合成；（2）提取被測(cè)樣本的KRAS基因組DNA；（3）配制反應(yīng)體系；（4）PCR反應(yīng)；PCR反應(yīng)完成后進(jìn)行熔解曲線分析，通過(guò)熔解峰的Tm值判斷出被測(cè)樣本中是否發(fā)生了KRAS突變。本發(fā)明將分子信標(biāo)探針和延伸阻滯引物結(jié)合起來(lái)，并利用無(wú)5’→3’外切酶活性聚合酶進(jìn)行體外快速檢測(cè)KRAS突變，不僅節(jié)省了耗材，同時(shí)具有高靈敏度，高特異性的特點(diǎn)，使檢測(cè)結(jié)果更可靠。