一種基于探針熔解技術準確檢測BRAF基因突變的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310026087.5 申請日 -
公開（公告）號 CN103103269B 公開（公告）日 2015-07-15
申請公布號 CN103103269B 申請公布日 2015-07-15
分類號 C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 戴鵬高;陳超;劉金輝;焦維麗;鄒暉 申請（專利權）人 陜西佰美醫(yī)學檢驗有限公司
代理機構 西安智邦專利商標代理有限公司 代理人 陜西佰美基因股份有限公司;陜西佰美醫(yī)學檢驗有限公司
地址 710069 陜西省西安市太白北路229號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提出一種基于探針熔解技術準確檢測BRAF基因突變的方法，不僅節(jié)省了耗材，同時具有高靈敏度，高特異性的特點，檢測結果更可靠。該方法包括以下步驟：（1）分子信標探針和模板擴增引物的設計及合成；其中設計的上游引物(27nt)為5’-TGTTTTCCTTTACTTACTACACCTCAG-3’，延伸阻滯引物(43nt)為5’-acGCTACAGTGAAATCTCGGACAACTGTTCAAACTGATGGGAC-3’，分子信標探針(35nt)為FAM-ccgcaTCGAGATTTCACTGTAGCTAGACCAtgcgg-BHQ2；（2）提取被測樣本的基因組DNA；（3）配制反應體系；（4）PCR反應。