一種融合蛋白及含有其的由雙脫氨酶介導(dǎo)的堿基編輯系統(tǒng)和應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202210193759.0 申請日 -
公開（公告）號(hào) CN114480348A 公開（公告）日 2022-05-13
申請公布號(hào) CN114480348A 申請公布日 2022-05-13
分類號(hào) C12N9/22（2006.01）I;C12N9/78（2006.01）I;C12N9/24（2006.01）I;C07K19/00（2006.01）I;C12N15/62（2006.01）I;C12N15/113（2010.01）I;C12N15/10（2006.01）I;C12N15/87（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 賴良學(xué);王可品;梁艷慧;謝精科 申請（專利權(quán)）人 中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院
代理機(jī)構(gòu) 北京品源專利代理有限公司 代理人 -
地址 510530廣東省廣州市科學(xué)城開源大道190號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種融合蛋白及含有其的由雙脫氨酶介導(dǎo)的堿基編輯系統(tǒng)和應(yīng)用。所述融合蛋白包括核酸酶、胞嘧啶脫氨酶和腺嘌呤脫氨酶，所述核酸酶包括含有D10A突變的SpCas9蛋白。本發(fā)明所述融合蛋白能夠和sgRNA形成復(fù)合物組成由雙脫氨酶介導(dǎo)的堿基編輯系統(tǒng)，在該系統(tǒng)中，sgRNA與融合蛋白形成復(fù)合物后，sgRNA能引導(dǎo)融合蛋白對靶序列進(jìn)行識(shí)別和切割，并發(fā)生類型多樣的堿基編輯。使用本發(fā)明的堿基編輯系統(tǒng)，可以高效地實(shí)現(xiàn)包括C?to?G、C?to?T、C?to?A和A?to?G等多類型的單堿基轉(zhuǎn)換或多堿基的同時(shí)轉(zhuǎn)換，以及多個(gè)堿基的隨機(jī)插入或刪除。表明該系統(tǒng)可用于構(gòu)建基因飽和突變文庫或研究特定細(xì)胞類群的發(fā)育軌跡。