檢測EGFR-T790M和EGFR-C797S順反式突變構(gòu)型的方法和探針

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010726064.5 申請日 -
公開（公告）號 CN111662986A 公開（公告）日 2020-09-15
申請公布號 CN111662986A 申請公布日 2020-09-15
分類號 C12Q1/6886(2018.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 唐東江;趙計(jì)昌;黃雅菁 申請（專利權(quán)）人 珠海圣美生物診斷技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京超成律師事務(wù)所 代理人 珠海圣美生物診斷技術(shù)有限公司
地址 519000廣東省珠海市香洲區(qū)同昌路266號3棟3層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種檢測EGFR?T790M和EGFR?C797S順反式突變構(gòu)型的方法和探針，涉及基因檢測技術(shù)領(lǐng)域。該方法包括分別使用選擇性抑制T790野生型的探針和選擇性抑制C797野生型的探針體系對樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然后對各擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序，根據(jù)測序結(jié)果判定樣本中T790和C797的突變構(gòu)型。上述方法能夠有效地區(qū)分T790M和C797S順反式突變構(gòu)型，特異性非常高，可以直接給出樣本序列信息；同時(shí)還具有靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)，采用依次經(jīng)偏向性擴(kuò)增和非偏向性擴(kuò)增的兩段式PCR擴(kuò)增，再采用低成本的Sanger測序可以檢出低至0.1％的突變；NGS測序則可以在保障高靈敏度的同時(shí)通過降低測序深度降低成本。??