一種體外合成siRNA的純化方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111194960.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN113755546A 公開(kāi)（公告）日 2021-12-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN113755546A 申請(qǐng)公布日 2021-12-07
分類號(hào) C12P19/34（2006.01）I;C12N15/10（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李萍;唐雪明;李學(xué)文 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 硅羿科技（上海）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州市中南偉業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 王玉仙
地址 200000上海市浦東新區(qū)新場(chǎng)鎮(zhèn)新浩路43號(hào)C區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種體外合成siRNA的純化方法。本發(fā)明的純化方法具體指體外轉(zhuǎn)錄合成siRNA后進(jìn)行純化，得到高純度的siRNA。具體操作流程：將帶有T7啟動(dòng)子的DNA模板體外轉(zhuǎn)錄合成siRNA；DNaseI降解DNA模板，S1核酸酶降解單鏈DNA和RNA；磁珠純化富集siRNA；核酸吸附柱進(jìn)一步去除小于20nt的核酸、堿基，以得到純度很高的siRNA。這種制備方式快捷、便宜，且產(chǎn)物的純度比市場(chǎng)銷售的siRNA體外轉(zhuǎn)錄試劑盒要高很多，避免了市售體外轉(zhuǎn)錄試劑盒得到的產(chǎn)物中有過(guò)多雜質(zhì)，而使實(shí)驗(yàn)結(jié)果非常不穩(wěn)定。極大的提高了體外轉(zhuǎn)錄制備siRNA的質(zhì)量，提高實(shí)驗(yàn)效率，減少假陰性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，具有非常高的推廣價(jià)值。