利用CRISPR/Cas12a系統(tǒng)靶向富集核酸目標(biāo)區(qū)域的方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010146552.9 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN113355389A 公開（公告）日 2021-09-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN113355389A 申請(qǐng)公布日 2021-09-07
分類號(hào) C12Q1/6806（2018.01）I;C40B50/06（2006.01）I;C12Q1/6869（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 趙書紅;付亮亮;楊翔;李新云;陳輝;周鵬 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣西揚(yáng)翔股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 肖陽(yáng)
地址 537100廣西壯族自治區(qū)貴港市江南工業(yè)園區(qū)城東大道與工業(yè)一路交匯處東北角
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種利用CRISPR/Cas12a系統(tǒng)靶向富集核酸目標(biāo)區(qū)域的方法及其應(yīng)用。該方法包括（1）設(shè)計(jì)第一和第二RNA，第一RNA除第一sgRNA分子，還含有第一互補(bǔ)序列，第二RNA除第二sgRNA分子，還含有第二互補(bǔ)序列，第一sgRNA分子和第一互補(bǔ)序列與目標(biāo)區(qū)域上游互補(bǔ)，第二sgRNA分子和第二互補(bǔ)序列與目標(biāo)區(qū)域下游互補(bǔ)；（2）與Cas12a蛋白混合獲得復(fù)合物；（3）將復(fù)合物、核酸、逆轉(zhuǎn)錄酶、變性劑和dNTP混合孵育和變性，獲得變性產(chǎn)物；（4）去除RNA和蛋白質(zhì)，擴(kuò)增獲得富集產(chǎn)物。由此可簡(jiǎn)便、快捷實(shí)現(xiàn)目標(biāo)區(qū)域的富集，應(yīng)用于測(cè)序領(lǐng)域。