一種NGS核心酶Klenow片段的誘導(dǎo)純化及質(zhì)控方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202210057159.1 申請日 -
公開（公告）號 CN114085822A 公開（公告）日 2022-02-25
申請公布號 CN114085822A 申請公布日 2022-02-25
分類號 C12N9/12（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N15/54（2006.01）I;C12Q1/6869（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 胡佳佳;韓典霖 申請（專利權(quán)）人 濟(jì)凡生物科技（北京）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 李洋
地址 102208北京市昌平區(qū)回龍觀街道龍祥制版工業(yè)園5號院4號樓濟(jì)凡生物（北京）有限公司
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種NGS核心酶Klenow片段的制備方法及其應(yīng)用。本發(fā)明提供的NGS核心酶Klenow片段的制備方法包括如下步驟：1）將Klenow片段表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主菌，得到重組菌；2）在所述重組菌的培養(yǎng)體系中添加0.5 mM的IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到誘導(dǎo)后菌體；3）從所述誘導(dǎo)后菌體中純化得到所述Klenow片段，所述純化的方法依次包括如下步驟：PEI沉淀核酸、飽和硫酸銨沉淀目的蛋白、Ni2+柱富集目的蛋白、Q柱除去雜蛋白和殘余核酸以及丁基疏水柱去除雜蛋白。通過實驗證明：按照本發(fā)明方法制備得到的Klenow片段產(chǎn)量和純度高，能更好的滿足NGS的需求。