一種外周血NK細胞的培養(yǎng)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110603612.X 申請日 -
公開(公告)號 CN113249321A 公開(公告)日 2021-08-13
申請公布號 CN113249321A 申請公布日 2021-08-13
分類號 C12N5/0783 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 占震鋒;李慶靜 申請(專利權)人 上海南濱江細胞生物科技有限公司
代理機構 合肥正則元起專利代理事務所(普通合伙) 代理人 王俊曉
地址 200000 上海市閔行區(qū)園美路58號3幢401室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種外周血NK細胞的培養(yǎng)方法,屬于細胞培養(yǎng)技術領域,包括以下步驟:首先獲取人體外周血,加入抗凝劑防止凝聚,加入細胞裂解液進行裂解,去除紅細胞,得到混合細胞液,然后利用磁珠分選法去除混合細胞液中的CD3+淋巴細胞,獲得CD?淋巴細胞;然后加入細胞因子IL?2和IL?15進行初步培養(yǎng),將初步培養(yǎng)細胞液接種到預先包被的培養(yǎng)瓶中,添加體積分數(shù)10%的自體血漿和終濃度為500IU/mL的IL?2進行二次刺激;最后進行NK細胞的分選,得到純度較高的NK細胞,本發(fā)明的培養(yǎng)方法能夠有效擴增NK細胞,顯著提高其表面活化受體的表達,從而增強其對腫瘤細胞的殺傷活性。