編碼PCR二代測序建庫方法、試劑盒及檢測方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN201710102701.X | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN108504649B | 公開(公告)日 | 2021-03-05 |
申請公布號 | CN108504649B | 申請公布日 | 2021-03-05 |
分類號 | C12Q1/6806(2018.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I | 分類 | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 黃新華;戴慧清 | 申請(專利權(quán))人 | 金弗康生物科技(上海)股份有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 上海市匯業(yè)律師事務(wù)所 | 代理人 | 陸紅杰 |
地址 | 201114上海市閔行區(qū)恒南路1358號5幢1010室 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了一種編碼PCR二代測序建庫方法,步驟包括:1)提取DNA;2)用帶隨機(jī)分子編碼序列的單端特異引物進(jìn)行正向單鏈線性擴(kuò)增反應(yīng);3)用對側(cè)單端特異引物與公共接頭引物構(gòu)成引物對,進(jìn)行單端特異指數(shù)擴(kuò)增反應(yīng);4)用測序雙端公共接頭引物對進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增反應(yīng);5)定量質(zhì)檢,獲得DNA文庫。本發(fā)明還公開了用上述DNA文庫進(jìn)行測序檢測的方法,及包含該DNA文庫的編碼PCR二代測序建庫試劑盒。本發(fā)明通過將樣品原始DNA模板序列在初始互補(bǔ)合成中進(jìn)行編碼,使測序結(jié)果可以根據(jù)編碼溯源檢出初始DNA模板的真實(shí)序列和真實(shí)檢出分子數(shù),從而顯著降低了突變假陽性和假陰性。?? |
