編碼PCR二代測序建庫方法、試劑盒及檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710102701.X 申請日 -
公開（公告）號 CN108504649A 公開（公告）日 2018-09-07
申請公布號 CN108504649A 申請公布日 2018-09-07
分類號 C12N15/10;C12N15/11;C40B50/06;G06F19/24 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃新華;戴慧清 申請（專利權(quán)）人 金弗康生物科技（上海）股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海市匯業(yè)律師事務(wù)所 代理人 陸紅杰
地址 201321 上海市浦東新區(qū)康新公路3399弄25號樓5層504室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種編碼PCR二代測序建庫方法，步驟包括：1)提取DNA；2)用帶隨機(jī)分子編碼序列的單端特異引物進(jìn)行正向單鏈線性擴(kuò)增反應(yīng)；3)用對側(cè)單端特異引物與公共接頭引物構(gòu)成引物對，進(jìn)行單端特異指數(shù)擴(kuò)增反應(yīng)；4)用測序雙端公共接頭引物對進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增反應(yīng)；5)定量質(zhì)檢，獲得DNA文庫。本發(fā)明還公開了用上述DNA文庫進(jìn)行測序檢測的方法，及包含該DNA文庫的編碼PCR二代測序建庫試劑盒。本發(fā)明通過將樣品原始DNA模板序列在初始互補(bǔ)合成中進(jìn)行編碼，使測序結(jié)果可以根據(jù)編碼溯源檢出初始DNA模板的真實(shí)序列和真實(shí)檢出分子數(shù)，從而顯著降低了突變假陽性和假陰性。