突變基因的定量檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610353070.4 申請日 -
公開（公告）號 CN107435061A 公開（公告）日 2017-12-05
申請公布號 CN107435061A 申請公布日 2017-12-05
分類號 C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃新華;戴慧清 申請（專利權(quán)）人 金弗康生物科技（上海）股份有限公司
代理機構(gòu) 上海浦一知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 丁紀鐵
地址 201114 上海市閔行區(qū)恒南路1358號5幢1010室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種突變基因的定量檢測方法，步驟包括：1)提取樣本DNA；2)單鏈合成反應；3)微球捕獲純化；4)微球上的3’端保護性外切純化反應；5)以步驟4)的產(chǎn)物為模板進行微球上的單鏈合成反應，分離去除微球；6)3’端保護性外切純化反應；7)雙端接頭橋媒連接反應，并純化；8)以前次純化產(chǎn)物為模板，反復進行單鏈合成反應和3’端保護性外切純化反應；9)定量，測序，判斷突變基因。該方法以靶標基因片段為模板進行反復多循環(huán)單鏈合成反應，將原始模板上系列位點的堿基轉(zhuǎn)化為互補序列，使靶標基因序列最大保真地轉(zhuǎn)化合成，經(jīng)多級單鏈合成后，獲得測序所需的足量完整待測序列，如此提高了低比例突變基因的檢測靈敏度和保真度。