用于擴(kuò)增子測序的引物及兩步PCR建庫方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911101431.6 申請日 -
公開（公告）號 CN110878334A 公開（公告）日 2020-03-13
申請公布號 CN110878334A 申請公布日 2020-03-13
分類號 C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06;C12N15/11 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉繼強 申請（專利權(quán)）人 北京康普森生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京康普森生物技術(shù)有限公司
地址 102206 北京市昌平區(qū)生命科學(xué)園生命園路4號院4號樓7層701
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種用于擴(kuò)增子測序的引物及兩步PCR建庫方法，該方法包括：1)提取待測物種樣本的基因組DNA；2)在多重PCR正、反向引物的5’端分別連接通用引物序列，以基因組DNA為模板，進(jìn)行第一輪多重PCR，得到兩端帶有通用引物序列的PCR產(chǎn)物；3)純化第一輪PCR產(chǎn)物；4)在測序標(biāo)簽序列的兩端分別連接與第一輪PCR通用引物序列相匹配的引物序列，獲得攜帶標(biāo)簽序列的PCR產(chǎn)物，并以其為模板進(jìn)行第二輪PCR；5)純化PCR產(chǎn)物，質(zhì)檢合格后上機測序。本發(fā)明采用兩步PCR法建庫，降低了擴(kuò)增子測序成本，使檢測成本降50％以上，同時有效提升擴(kuò)增子質(zhì)量指標(biāo)，即提高了位點檢出率和數(shù)據(jù)均一性，有極高的經(jīng)濟(jì)價值。