BRAF基因V600E突變數(shù)字PCR檢測體系的優(yōu)化方法及檢測產(chǎn)品

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811191488.5 申請日 -
公開（公告）號 CN109295226A 公開（公告）日 2019-02-01
申請公布號 CN109295226A 申請公布日 2019-02-01
分類號 C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12Q1/6851 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 趙新泰;王明;潘文健 申請（專利權(quán)）人 上海賽安生物醫(yī)藥科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海海頌知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 上海賽安生物醫(yī)藥科技股份有限公司
地址 200436 上海市寶山區(qū)上大路1號文景樓2樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種BRAF基因V600E突變數(shù)字PCR檢測體系的優(yōu)化方法，檢測體系包括上游引物、下游引物、野生型探針、突變型探針、野生型模板和突變型模板；野生型模板是酶切后的正常人體gDNA，突變型模板是酶切后的插入BRAF基因V600E突變片段的突變質(zhì)粒；將突變型模板和野生型模板按一定的拷貝數(shù)比例配制成標(biāo)準(zhǔn)品，采用數(shù)字PCR以中突變頻率標(biāo)準(zhǔn)品為模板進(jìn)行反應(yīng)，根據(jù)反應(yīng)數(shù)據(jù)制作數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)圖，選定野生型的熒光區(qū)域和突變型的熒光區(qū)域。采用數(shù)字PCR以野生型模板為模板進(jìn)行反應(yīng)，確定背景閾值。通過本發(fā)明的BRAF基因V600E突變數(shù)字PCR檢測體系的優(yōu)化方法優(yōu)化后的檢測產(chǎn)品準(zhǔn)確度更高。