乳腺癌易感基因變異文庫(kù)構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201611187353.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN106754878B 公開(kāi)(公告)日 2020-02-25
申請(qǐng)公布號(hào) CN106754878B 申請(qǐng)公布日 2020-02-25
分類(lèi)號(hào) C12N15/10;C12Q1/6806;C40B50/06 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王明;趙會(huì) 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 上海賽安生物醫(yī)藥科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 成都頂峰專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 代理人 上海賽安生物醫(yī)藥科技有限公司;南京艾迪康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司
地址 210000 江蘇省南京市江寧區(qū)龍眠大道568號(hào)生命科技創(chuàng)新園北區(qū)11號(hào)樓(江寧高新園)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種乳腺癌易感基因變異文庫(kù)構(gòu)建方法,包括以下步驟:A.根據(jù)乳腺癌相關(guān)基因的變異區(qū)域,設(shè)計(jì)能夠檢測(cè)這些變異區(qū)域的引物對(duì);B.計(jì)算得到各引物對(duì)的判斷參數(shù)R,將判斷參數(shù)R的值小于或等于1的引物對(duì),歸為第一組引物組合液,將判斷參數(shù)R的值大于1的引物對(duì),歸為第二組引物組合液;C.將待測(cè)樣品DNA抽提純化;D.分別采用第一組引物組合液和第二組引物組合液對(duì)純化后的樣品進(jìn)行初始PCR擴(kuò)增;E.對(duì)所述目標(biāo)片段進(jìn)行接頭連接得到帶接頭片段;F.采用第一組引物組合液和第二組引物組合液的混合液進(jìn)行文庫(kù)PCR擴(kuò)增,得到測(cè)序文庫(kù)。本發(fā)明的乳腺癌易感基因變異文庫(kù)構(gòu)建方法所構(gòu)建的文庫(kù)測(cè)序通量高,靈敏度強(qiáng),特異性強(qiáng),能夠用于檢測(cè)游離DNA低頻突變的。