一種純化重組谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811647903.3 申請日 -
公開（公告）號 CN109593741A 公開（公告）日 2019-04-09
申請公布號 CN109593741A 申請公布日 2019-04-09
分類號 C12N9/10（2006.01）I; C07K19/00（2006.01）I; C07K1/22（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 史百鳴; 王運(yùn)龍; 盧雪峰; 李國瑩; 陸瑞琪 申請（專利權(quán)）人 江蘇一鳴生物股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州國卓知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 明志會
地址 225432 江蘇省泰州市泰興市根思一鳴路
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及提純技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種純化重組谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的方法，包括以下步驟；步驟一、在重組谷氨酰轉(zhuǎn)氨酶時，在重組谷氨酰轉(zhuǎn)氨的酶的C端添加組氨酸標(biāo)簽；步驟二、使目的蛋白谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶結(jié)合在鎳離子親和柱中的填料上；步驟三、使用A溶液沖洗步驟二得到的溶液至基線平衡，除去填料中的非目的蛋白；步驟四、使用B溶液洗脫步驟三得到的溶液的目的蛋白；步驟五、將步驟四得到的蛋白洗脫液中含有的氯化鈉和咪唑采用透析的方式除去，本發(fā)明使用鎳離子交換柱純化被體外活化的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶對洗脫酶液，使用透析法脫去鹽離子，處理?xiàng)l件溫和，蛋白損失小，可以提高谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的回收率，增加回收酶液的純度。