一種新型病原微生物檢測(cè)的方法
基本信息
申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201910756062.8 | 申請(qǐng)日 | - |
公開(kāi)(公告)號(hào) | CN110438199A | 公開(kāi)(公告)日 | 2019-11-12 |
申請(qǐng)公布號(hào) | CN110438199A | 申請(qǐng)公布日 | 2019-11-12 |
分類(lèi)號(hào) | C12Q1/6806(2018.01)I; C12Q1/6869(2018.01)I; C40B50/06(2006.01)I; C12Q1/04(2006.01)I; C12Q1/70(2006.01)I; G16B30/10(2019.01)I; G16B50/30(2019.01)I | 分類(lèi) | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 覃俊杰 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 深圳譜元科技有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 深圳市精英專(zhuān)利事務(wù)所 | 代理人 | 李翔宇 |
地址 | 518000 廣東省深圳市福田區(qū)福保街道福保社區(qū)市花路南側(cè)長(zhǎng)富金茂大廈1號(hào)樓2103 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了一種新型病原微生物檢測(cè)的方法,包括:腦脊液、肺泡灌洗液類(lèi)樣本收集步驟;外周血樣本采集步驟;DNA提取步驟,取400ul樣本用于檢測(cè),樣本中加入反應(yīng)試劑buffer GB、Lysis Enzyme K、RNA Carrier,56℃下反應(yīng)10min,獲得反應(yīng)液;反應(yīng)液經(jīng)硅膠膜吸附柱純化,去除鹽離子及有機(jī)試劑,得到總量、純度符合要求的DNA;文庫(kù)構(gòu)建步驟,所述DNA由末端修復(fù)、接頭連接、文庫(kù)擴(kuò)增富集、純化、質(zhì)控步驟處理,完成文庫(kù)構(gòu)建;測(cè)序步驟,文庫(kù)經(jīng)NaOH變性為單鏈后,結(jié)合到測(cè)序芯片上,經(jīng)橋式擴(kuò)增將每個(gè)單鏈DNA分子富集成為一個(gè)cluster,利用Illumina SBS測(cè)序方法讀取序列,獲得測(cè)序數(shù)據(jù);分析步驟,所述測(cè)序數(shù)據(jù)經(jīng)數(shù)據(jù)過(guò)濾、去除人源及接頭序列,剩余數(shù)據(jù)與微生物參考數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)。 |
