一種基于高通量測(cè)序的建庫(kù)方法
基本信息
申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010094903.6 | 申請(qǐng)日 | - |
公開(kāi)(公告)號(hào) | CN111321208A | 公開(kāi)(公告)日 | 2020-06-23 |
申請(qǐng)公布號(hào) | CN111321208A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-06-23 |
分類(lèi)號(hào) | C12Q1/6869(2018.01)I | 分類(lèi) | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 吳淵;畢書(shū)琳;李旭超;李健鵬;周文剛;鄭方克;鄭立謀 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 上海廈維醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 廈門(mén)市首創(chuàng)君合專(zhuān)利事務(wù)所有限公司 | 代理人 | 上海廈維生物技術(shù)有限公司;上海廈維醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司 |
地址 | 200000上海市閔行區(qū)新駿環(huán)路138號(hào)3幢201,202室 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了一種基于高通量測(cè)序的建庫(kù)方法。該方法適用于片段化后的基因組DNA/FFPE RNA/cfDNActDNA等核苷酸樣本。進(jìn)一步將核苷酸樣本片段進(jìn)行修飾與變性、接頭連接,再通過(guò)對(duì)目標(biāo)區(qū)進(jìn)行兩次特異性PCR反應(yīng)富集,可得到測(cè)序文庫(kù)。對(duì)上述測(cè)序文庫(kù)進(jìn)行質(zhì)控和定量分析,可進(jìn)行高通量測(cè)序。本發(fā)明還提供了一種模擬雙鏈連接接頭。該建庫(kù)方法簡(jiǎn)單方便,保留了基于擴(kuò)增子的多重PCR建庫(kù)方法的優(yōu)點(diǎn),同時(shí)可以用于檢測(cè)未知融合,尤其適用于片段化程度較高的核苷酸樣本(例如cfDNA/ctDNA樣本),對(duì)于存在損傷的DNA分子也可以用于建庫(kù),本發(fā)明方法能夠最大程度保留所有原始核苷酸信息,且使用該方法進(jìn)行RNA建庫(kù)時(shí)不需要進(jìn)行二連合成操作。?? |
