一種將多個(gè)外源基因同時(shí)克隆到微生物基因組的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201410621447.0 申請日 -
公開(公告)號(hào) CN104404077A 公開(公告)日 2015-03-11
申請公布號(hào) CN104404077A 申請公布日 2015-03-11
分類號(hào) C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12R1/865(2006.01)N 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 江會(huì)鋒;阮江星;丁文濤;許則灘;馬永碩;盧麗娜;董揚(yáng);馬延和 申請(專利權(quán))人 天工生物科技(天津)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 天津?yàn)I??凭曋R(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 韓敏
地址 300308 天津市濱海新區(qū)自貿(mào)試驗(yàn)區(qū)(空港經(jīng)濟(jì)區(qū))中環(huán)西路86號(hào)匯盈產(chǎn)業(yè)園8號(hào)樓1-201-A218
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種將多個(gè)外源基因同時(shí)克隆到微生物基因組的方法,是將多個(gè)外源基因先導(dǎo)入多個(gè)雙向基因表達(dá)載體,再將多個(gè)雙向基因表達(dá)載體同時(shí)導(dǎo)入宿主微生物。每個(gè)雙向基因表達(dá)載體均包括雙向終止子和雙向啟動(dòng)子;除第一個(gè)雙向基因表達(dá)載體和最后一個(gè)雙向基因表達(dá)載體外,其他每個(gè)雙向基因表達(dá)載體雙向終止子的3’末端和下一個(gè)雙向基因表達(dá)載體雙向終止子的5’末端具有相同的同源臂,第一個(gè)雙向基因表達(dá)載體雙向終止子的5’末端及最后一個(gè)雙向基因表達(dá)載體雙向終止子的3’末端均可以與宿主微生物的基因組發(fā)生同源重組。通過該方法,建立了一種將整個(gè)基因表達(dá)過程,包括表達(dá)設(shè)計(jì)、克隆設(shè)計(jì)、宿主細(xì)胞改造等過程有機(jī)地組合起來的新技術(shù)。