一種在斑馬魚基因組中實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)插入式敲除與鑒定的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110318035.X 申請日 -
公開（公告）號 CN112921037A 公開（公告）日 2021-06-08
申請公布號 CN112921037A 申請公布日 2021-06-08
分類號 C12N15/113;C12N9/22;C12N15/89;C12Q1/686 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄭永茂;肖詩偉;曾麗雯 申請（專利權(quán)）人 福州百維斯生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 福州元創(chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 饒文君;蔡學(xué)俊
地址 350007 福建省福州市倉山區(qū)建新鎮(zhèn)金塘路9號第9號樓標(biāo)準(zhǔn)廠房四層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種在斑馬魚基因組中實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)插入式敲除與鑒定的方法，利用Cas9蛋白，基因組靶向特異性導(dǎo)向RNA，輔以一條兩端帶有短同源臂，中間插入在斑馬魚基因組中無相似序列的通用型終止翻譯序列，來實(shí)現(xiàn)高效、精確、定點(diǎn)和定向的斑馬魚基因組插入式敲除。同時(shí)，提供特異的插入片段檢測用的引物，幫助實(shí)現(xiàn)基因敲除的快速檢測。該方法克服了目前已有的隨機(jī)敲除方法效率偏低、突變的隨機(jī)性以及陽性鑒定難等問題。