一種大規(guī)模提取用于轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞的無內(nèi)毒素質(zhì)粒的方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201910860233.1 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN112481252A | 公開（公告）日 | 2021-03-12 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112481252A | 申請(qǐng)公布日 | 2021-03-12 |
| 分類號(hào) | C12N15/10(2006.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 肖水冰;秦伏波;魯亮;萬定一 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 普健生物（武漢）科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 南京縱橫知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 徐瑛 |
| 地址 | 430200湖北省武漢市武漢東湖開發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)武漢國(guó)家生物產(chǎn)業(yè)基地項(xiàng)目B、C、D區(qū)研發(fā)樓B1棟 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開一種大規(guī)模提取用于轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞的無內(nèi)毒素質(zhì)粒的方法，包括常規(guī)堿裂解法獲得質(zhì)粒粗提取液，然后將上清液加入層析柱中并依次加入Tris?HCl和500～1000mmol/L NaCl混合液，Tris?HCl和1200mmol/L NaCl混合液得到無內(nèi)毒素的質(zhì)粒洗脫液，再用異丙醇沉淀質(zhì)粒并用TE緩沖液溶解得到目的質(zhì)粒。本發(fā)明的有益效果是：(1)利用質(zhì)粒和內(nèi)毒素的帶電荷量不同，用不同濃度的NaCl進(jìn)行洗脫以除去內(nèi)毒素，效果優(yōu)異，避免內(nèi)毒素去除試劑殘留對(duì)轉(zhuǎn)染細(xì)胞的影響；(2)使用常規(guī)試劑和儀器進(jìn)行質(zhì)粒提取，提取過程安全快速、節(jié)約成本、生產(chǎn)效率高，可大規(guī)模制備；(3)提取得到的質(zhì)粒純度高、超螺旋。?? |
