一種采用大腸桿菌表達(dá)串聯(lián)序列制備GLP-1或其類(lèi)似物多肽的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201911373533.3 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN111072783A 公開(kāi)（公告）日 2020-04-28
申請(qǐng)公布號(hào) CN111072783A 申請(qǐng)公布日 2020-04-28
分類(lèi)號(hào) C07K19/00;C07K14/605;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 分類(lèi) 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 辛中帥;趙珊珊;文良柱;平康康;徐曉峰;李夷平 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 江蘇萬(wàn)邦醫(yī)藥科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 215123 江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)生物納米園A4-213單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)一種采用大腸桿菌表達(dá)串聯(lián)序列制備GLP?1或其類(lèi)似物多肽的方法，本發(fā)明設(shè)計(jì)的GLP?1或其類(lèi)似物的重組串聯(lián)蛋白通式為：X?(Y?Z)n。其中：X為前導(dǎo)肽，Y為胰蛋白酶和CPB酶雙酶切位點(diǎn)或Kex2酶和CPB酶雙酶切位點(diǎn)及輔助序列，Z為GLP?1或其類(lèi)似物。n為串聯(lián)重復(fù)數(shù)。通過(guò)大腸桿菌原核表達(dá)體系進(jìn)行發(fā)酵誘導(dǎo)表達(dá)GLP?1或其類(lèi)似物的重組串聯(lián)蛋白形成的包涵體無(wú)需變性劑即可完全溶解，溶解液經(jīng)胰蛋白酶和CPB酶雙酶切或Kex2酶和CPB酶雙酶切獲得GLP?1或其類(lèi)似物。本方法獲得的GLP?1或其類(lèi)似物表達(dá)量高，酶切后GLP?1目的蛋白收率及酶切后純度高。