烯酮還原酶突變體及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110656803.2 申請日 -
公開（公告）號 CN113444702A 公開（公告）日 2021-09-28
申請公布號 CN113444702A 申請公布日 2021-09-28
分類號 C12N9/04（2006.01）I;C12N15/53（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N1/21（2006.01）I;C12P17/04（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳小龍;褚定軍;陳翰馳;朱林江;馮佳程;陸躍樂;謝曉強 申請（專利權(quán)）人 奧銳特藥業(yè)股份有限公司
代理機構(gòu) 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 陸惠中;王永偉
地址 317200浙江省臺州市天臺縣八都工業(yè)園區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了烯酮還原酶突變體及其在不對稱加氫制備布瓦西坦中間體的應(yīng)用。所述突變體是通過對氨基酸序列為SEQ ID NO:2所示的野生型烯酮還原酶進行突變改造后得到的突變體。該烯酮還原酶突變體在不對稱還原4?丙基?2（5H）?呋喃酮（化合物II）制備目標(biāo)產(chǎn)物布瓦西坦中間體（R）?4?正丙基二氫呋喃?2（5H）?酮（化合物I）中表現(xiàn)出顯著性的優(yōu)點。將該突變體酶通過大腸桿菌過量表達后用于催化反應(yīng)，并以化合物II為底物，在NAD（P）/NAD（P）H輔酶循環(huán)系統(tǒng)輔助下，進行不對稱C＝C加氫還原反應(yīng)，制備布瓦西坦中間體（化合物I），其底物轉(zhuǎn)化率>99％，布瓦西坦中間體產(chǎn)物的ee值>99％，表現(xiàn)出良好的工業(yè)應(yīng)用性能。