烯酮還原酶突變體及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110656803.2 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN113444702A 公開（公告）日 2021-09-28
申請(qǐng)公布號(hào) CN113444702A 申請(qǐng)公布日 2021-09-28
分類號(hào) C12N9/04（2006.01）I;C12N15/53（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N1/21（2006.01）I;C12P17/04（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳小龍;褚定軍;陳翰馳;朱林江;馮佳程;陸躍樂;謝曉強(qiáng) 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 奧銳特藥業(yè)股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 陸惠中;王永偉
地址 317200浙江省臺(tái)州市天臺(tái)縣八都工業(yè)園區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了烯酮還原酶突變體及其在不對(duì)稱加氫制備布瓦西坦中間體的應(yīng)用。所述突變體是通過對(duì)氨基酸序列為SEQ ID NO:2所示的野生型烯酮還原酶進(jìn)行突變改造后得到的突變體。該烯酮還原酶突變體在不對(duì)稱還原4?丙基?2（5H）?呋喃酮（化合物II）制備目標(biāo)產(chǎn)物布瓦西坦中間體（R）?4?正丙基二氫呋喃?2（5H）?酮（化合物I）中表現(xiàn)出顯著性的優(yōu)點(diǎn)。將該突變體酶通過大腸桿菌過量表達(dá)后用于催化反應(yīng)，并以化合物II為底物，在NAD（P）/NAD（P）H輔酶循環(huán)系統(tǒng)輔助下，進(jìn)行不對(duì)稱C＝C加氫還原反應(yīng)，制備布瓦西坦中間體（化合物I），其底物轉(zhuǎn)化率>99％，布瓦西坦中間體產(chǎn)物的ee值>99％，表現(xiàn)出良好的工業(yè)應(yīng)用性能。