一種敲除AAV受體的方法、敲除了AAV受體的HEK293細(xì)胞株及其應(yīng)用
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201710553164.0 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN107245475B | 公開(kāi)（公告）日 | 2019-07-16 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN107245475B | 申請(qǐng)公布日 | 2019-07-16 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N5/10;C12N15/85;C12N15/90;C12N7/00;C12R1/93 | 分類(lèi) | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 李華鵬 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 | 廣州派真生物技術(shù)有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 廣州容大專(zhuān)利代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | 廣州派真生物技術(shù)有限公司 |
| 地址 | 511370 廣東省廣州市高新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)攬?jiān)侣?號(hào)科學(xué)城國(guó)際企業(yè)孵化器G棟304 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明涉及基因工程和細(xì)胞學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種AAV受體敲除方法、敲除AAV受體的HEK293細(xì)胞株及其應(yīng)用；所述被敲除的AAV受體為KIAA0319L；所述敲除方法包括：構(gòu)建靶向AAVR基因組序列的sgRNA載體；轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，培養(yǎng)得到各克隆細(xì)胞；Surveyor基因突變分析試驗(yàn)；選出AAVR突變的單克?。辉龠x擇出高產(chǎn)AAV的AAVR突變細(xì)胞株；鑒定其它潛在突變位點(diǎn)的突變情況；把無(wú)其它突變位點(diǎn)的細(xì)胞株再擴(kuò)大，建庫(kù)以備生產(chǎn)。本發(fā)明的被敲除的AAV受體的HEK293細(xì)胞株生產(chǎn)AAV的最終產(chǎn)量比常規(guī)HEK293產(chǎn)量高出約50％。 |
