誘導(dǎo)多能干細(xì)胞有飼養(yǎng)層的培養(yǎng)方法及應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111431208.5 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN114196621A 公開（公告）日 2022-03-18
申請(qǐng)公布號(hào) CN114196621A 申請(qǐng)公布日 2022-03-18
分類號(hào) C12N5/074（2010.01）I;C12N5/077（2010.01）I;A01K67/027（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 江斌;熊忠賢;熊瓊瓊 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 江西中洪博元生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州中合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 劉召民
地址 330052江西省南昌市南昌縣小藍(lán)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)小藍(lán)中大道346號(hào)16棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了誘導(dǎo)多能干細(xì)胞有飼養(yǎng)層的培養(yǎng)方法及應(yīng)用，培養(yǎng)方法包括：1）在培養(yǎng)瓶中加入明膠，搖勻覆蓋底面，放于37℃培養(yǎng)箱至少15min，加入事先水浴加熱至37℃的MEF完全培養(yǎng)液，將復(fù)蘇的MEF飼養(yǎng)層細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液并傳代至P3代，加入到培養(yǎng)瓶中；2）將復(fù)蘇的iPS細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液，轉(zhuǎn)移至鋪好MEF飼養(yǎng)層細(xì)胞的培養(yǎng)板中，置于37℃，5％CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；3）將傳代培養(yǎng)的iPS細(xì)胞用0.125％的胰酶消化細(xì)胞后，用不含MEF的小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液，接種在0.1％明膠預(yù)先包被的培養(yǎng)皿中，37℃孵育50min去除MEF后，將上液移入培養(yǎng)板中培養(yǎng)，以制備EBS擬胚體。