一種高效表達(dá)工程菌重組蛋白的方法及應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> HK14110717.5 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) HK1197265A 公開(公告)日 2015-01-09
申請(qǐng)公布號(hào) HK1197265A 申請(qǐng)公布日 2015-01-09
分類號(hào) C12N;C07K;C12R 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 丘小慶 申請(qǐng)(專利權(quán))人 畿晉慶三聯(lián)(北京)生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 香港知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 畿晉慶三聯(lián)(北京)生物技術(shù)有限公司
地址 中國(guó)內(nèi)地/中國(guó) 北京市海淀區(qū) 蘇家坨鎮(zhèn)前沙澗村東1000米
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 提供高度的方法表達(dá)重組蛋白的工程菌和用途。該方法包括以下步驟:(1)對(duì)大腸桿菌工程菌與PET系統(tǒng)轉(zhuǎn)染重組突變質(zhì)粒中得到陽(yáng)性單克隆菌落;(2)陽(yáng)性單克隆菌落富集,得到種子菌液,和種子菌液誘導(dǎo)到富集與生長(zhǎng)在大量;和(3)含有該重組蛋白的細(xì)菌上清液為表達(dá)目標(biāo)arated,和將該重組菌提取上清液中的蛋白質(zhì)和純化。該方法其特征在于:所述的工程菌大腸桿菌E。coli b834與PET系統(tǒng)(DE3)。質(zhì)量的成分富集培養(yǎng)基,蛋白純化步驟也優(yōu)化,使得顯著的改進(jìn)在實(shí)現(xiàn)蛋白的收率和純度,該方法適合應(yīng)用到大型生產(chǎn)重組蛋白表達(dá)的大腸桿菌工程菌