一種高效表達(dá)工程菌重組蛋白的方法及應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201110380864.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN103131724B 公開(kāi)（公告）日 2015-02-25
申請(qǐng)公布號(hào) CN103131724B 申請(qǐng)公布日 2015-02-25
分類號(hào) C12N15/70(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 丘小慶 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 畿晉慶三聯(lián)（北京）生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京海虹嘉誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 畿晉慶三聯(lián)（北京）生物技術(shù)有限公司
地址 100095 北京市海淀區(qū)蘇家坨前沙澗村1000米
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明“一種高效表達(dá)工程菌重組蛋白的方法及應(yīng)用”，屬于生物制藥工程。該方法包括如下步驟：(1)重組突變質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌中得到陽(yáng)性單克隆菌落，(2)對(duì)陽(yáng)性單克隆菌落進(jìn)行增菌得到種子菌液，誘導(dǎo)所述種子菌液大量增菌生長(zhǎng)，(3)分離含有表達(dá)的目的重組蛋白的菌體上清液，提純菌體上清液中的重組蛋白，其特征在于：所述大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌指E.coli?B834(DE3)。本發(fā)明還進(jìn)一步對(duì)大量增菌培養(yǎng)基的成分及蛋白質(zhì)純化步驟進(jìn)行了優(yōu)化，在蛋白質(zhì)產(chǎn)量和純度上都得到了明顯的提高。使本發(fā)明的方法適合于應(yīng)用在大腸桿菌工程菌表達(dá)重組蛋白的規(guī)?；a(chǎn)中。