一種高效表達工程菌重組蛋白的方法及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> TW101145214 申請日 -
公開（公告）號 TWI541350B 公開（公告）日 2016-07-11
申請公布號 TWI541350B 申請公布日 2016-07-11
分類號 C12N15/67;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 丘小慶 申請（專利權(quán)）人 畿晉慶三聯(lián)（北京）生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 蘇騰昇 代理人 畿晉慶三聯(lián)（北京）生物技術(shù)有限公司
地址 中國大陸
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明“一種高效表達工程菌重組蛋白的方法及其應(yīng)用”，屬於生物制藥工程該方法包括如下步驟：(1)重組突變質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌中得到陽性單克隆菌落，(2)對陽性單克隆菌落進行增菌得到種子菌液，誘導(dǎo)所述種子菌液大量增菌生長，(3)分離含有表達的目的重組蛋白的菌體上清液，提純菌體上清液中的重組蛋白，其特徵在於：所述大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌指E.coli B834(DE3)本發(fā)明還進一步對大量增菌培養(yǎng)基的成分及蛋白質(zhì)純化步驟進行了優(yōu)化，在蛋白質(zhì)產(chǎn)量和純度上都得到了明顯的提高使本發(fā)明的方法適合於應(yīng)用在大腸桿菌工程菌表達重組蛋白的規(guī)模化生產(chǎn)中