等溫?cái)U(kuò)增核酸靶序列的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110733555.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN113481283A 公開(kāi)（公告）日 2021-10-08
申請(qǐng)公布號(hào) CN113481283A 申請(qǐng)公布日 2021-10-08
分類號(hào) C12Q1/6844（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊孫孝;朱兆奎;昃白塵 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 上海伯杰醫(yī)療科技有限公司北京分公司
代理機(jī)構(gòu) 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 黃爽
地址 100083 北京市海淀區(qū)花園北路35號(hào)9號(hào)樓2層210室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種等溫?cái)U(kuò)增核酸靶序列的方法。該方法適用于雙鏈DNA、單鏈DNA、單鏈RNA，包括切口酶和鏈置換酶的聯(lián)合反應(yīng)，在進(jìn)行雙鏈DNA和單鏈DNA檢測(cè)時(shí)，采用3條引物和1條探針，而進(jìn)行單鏈RNA檢測(cè)時(shí)，可以為3條引物和1條探針，也可以是2條引物和1條探針。探針為分子信標(biāo)，擴(kuò)增過(guò)程中不發(fā)生降解，僅用于特異性結(jié)合目標(biāo)片段，提供熒光信號(hào)，保證反應(yīng)的特異性。本發(fā)明采用與引物之間在靶序列上的結(jié)合區(qū)域沒(méi)有重疊的信標(biāo)探針來(lái)實(shí)時(shí)判斷結(jié)果，信標(biāo)探針結(jié)合目標(biāo)序列具有很強(qiáng)的特異性；同時(shí)反應(yīng)后不開(kāi)管，進(jìn)一步避免假陽(yáng)性的產(chǎn)生；反應(yīng)在恒定溫度下進(jìn)行，耗時(shí)短，8min內(nèi)即可完成檢測(cè)，更符合POCT檢測(cè)需求。