實時熒光定量PCR檢測PD-L1基因表達量的方法、引物及試劑盒
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN201811175288.0 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN111020029A | 公開(公告)日 | 2020-04-17 |
申請公布號 | CN111020029A | 申請公布日 | 2020-04-17 |
分類號 | C12Q1/6886;C12N15/11;C12Q1/6851 | 分類 | 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 唐向榮;唐志君;張冀申 | 申請(專利權)人 | 上??蹬赡岫麽t(yī)療科技有限公司 |
代理機構 | 上海金盛協(xié)力知識產(chǎn)權代理有限公司 | 代理人 | 上??蹬赡岫麽t(yī)療科技有限公司 |
地址 | 201313 上海市浦東新區(qū)康新公路3399弄26號215室 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了一種實時熒光定量PCR檢測PD?L1基因表達量的方法、引物及試劑盒,所述方法,包括如下步驟:(1)同步抽提樣本中的DNA及mRNA;(2)以待測mRNA為模板,通過特殊的反轉錄引物合成第一鏈cDNA;(3)分別采用反轉錄引物上的特異序列所對應的引物及參照基因對應的特異性引物,以反轉錄產(chǎn)物cDNA及參照基因DNA為模板,進行雙通道實時熒光定量PCR擴增,同時擴增目的基因cDNA與參照基因,并以參照基因和目的基因序列連接構建的質粒為標準品,根據(jù)各自的標準曲線,計算樣本中目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的表達水平,本發(fā)明同步修正各種實驗操作誤差,保證了結果的可靠性和可重復性。 |
